Comparison of primers for RAPD-PCR from environmental isolates of Cryptococcus neoformans, Cryptococcus albidus and Cryptococcus laurentii complex

Various organisms have been characterized by molecular methods, including fungi of the genus Cryptococcus. The purposes of this study were: to determine the discriminatory potential of the RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) primers, the pattern of similarity of the Cryptococcus species, and discuss their useful application in epidemiological studies. We analyzed 10 isolates of each specie/group: C. albidus, C. laurentii complex, C. neoformans var. grubii, all from environmental source, and two ATCC strains, C. neoformans var. grubii ATCC 90112, and C. neoformans var. neoformans ATCC 28957 by RAPD-PCR using the primers CAV1, CAV2, ZAP19, ZAP20, OPB11 and SEQ6. The primers showed a good discriminatory power, revealing important differences between them and between species; the SEQ6 primer discriminated a larger number of isolates of three species. Isolates of C. laurentii showed greater genetic diversity than other species revealed by all six primers. Isolates of C. neoformans were more homogeneous. Only the primer CAV2 showed no amplification of DNA bands for C. albidus. It was concluded that the use of limited number of carefully selected primers allowed the discrimination of different isolates, and some primers (e.g., CAV2 for C. albidus) may not to be applied to some species.

Avaliação da produção de melanina por espécies de Cryptococcus em quatro diferentes meios de cultura / Evaluation of melanin production by Cryptococcus species in four different culture media

A capacidade de Cryptococcus spp produzir melanina em meios contendo compostos fenólicos é amplamente utilizada na identificação destas espécies no laboratório. O objetivo do presente trabalho foi comparar a produção desse pigmento em quatro meios de cultura por Cryptococcus sp. Foram testadas 16 cepas de Cryptococcus neoformans, 17 de Cryptococcus albidus, 13 de Cryptococcus laurentii, e 2 de Cryptococcus uniguttulatus nos meios: ágar batata e cenoura, ágar alpiste, ágar semente de girassol e ágar L-dopa. A produção de melanina foi avaliada com base na pigmentação das colônias, e demonstrada em 5 dias de incubação por 93,8 por cento das cepas de Cryptococcus neoformans nos meios ágar batata e cenoura, ágar semente de girassol e ágar L-dopa. Dos isolados de Cryptococcus albidus, 29,4 por cento produziram o pigmento em ágar batata e cenoura e L-dopa, 11,8 por cento em ágar alpiste, e 36 por cento em ágar girassol. De Cryptococcus laurentii, 53,8 por cento produziram em batata e cenoura e em semente de girassol, 61,5 por cento em L-dopa, 84,6 por cento em ágar alpiste. Somente uma cepa de Cryptococcus uniguttulatus produziu fracamente o pigmento em ágar batata e cenoura.

The capacity of Cryptococcus spp to produce melanin in media containing phenol compounds is widely used for identifying these species in the laboratory. The aim of the present study was to compare the production of this pigment by Cryptococcus spp. in four culture media. Sixteen strains of Cryptococcus neoformans, 17 of Cryptococcus albidus, 13 of Cryptococcus laurentii and two of Cryptococcus uniguttulatus were tested in the following media: potato-carrot agar, Niger seed agar, sunflower seed agar and L-dopa agar. The melanin production was evaluated on the basis of colony pigmentation. Its production after five days of incubation was demonstrated by 93.8 percent of the strains of Cryptococcus neoformans in the media of potato-carrot agar, sunflower seed agar and L-dopa agar. From the isolates of Cryptococcus albidus, 29.4 percent produced the pigment in potato-carrot agar and L-dopa agar, 11.8 percent in Niger seed agar and 36 percent in sunflower seed agar. From Cryptococcus laurentii, 53.8 percent produced the pigment in potato-carrot agar and sunflower seed agar, 61.5 percent in L-dopa agar and 84.6 percent in Niger seed agar. Only one strain of Cryptococcus uniguttulatus presented slight production of the pigment, in potato-carrot agar.

Uso de psicotrópicos entre universitários da área da saúde da Universidade Federal do Amazonas, Brasil / Use of psychoactive drugs by health sciences undergraduate students at the Federal University in Amazonas, Brazil

Foi realizado um levantamento sobre uso de psicotrópicos entre estudantes da Faculdade de Ciências da Saúde da Universidade Federal do Amazonas, Manaus, Brasil, em uma amostra de 521 alunos. O "uso na vida" de álcool foi relatado por 87,7 por cento dos estudantes (IC95 por cento: 85,34-90,06) e o de tabaco por 30,7 por cento (IC 95 por cento: 27,39-34,01), sendo o último maior entre estudantes do sexo masculino (39,7 por cento; IC95 por cento: 33,33-46,01). As substâncias ilegais mais usadas foram: solventes (11,9 por cento; IC95 por cento: 9,57-14,23), maconha (9,4 por cento; IC95 por cento: 7,30-11,50), anfetamínicos e ansiolíticos (ambos com 9,2 por cento; IC95 por cento: 7,12-11,28), cocaína (2,1 por cento; IC95 por cento: 1,07- 3,13) e alucinógenos (1,2 por cento; IC95 por cento: 0,42-1,98). O principal motivo relatado para o uso de drogas ilegais foi a curiosidade. O "uso na vida" de esteróides anabolizantes foi citado por 2,1 por cento dos estudantes. O uso abusivo de álcool nos últimos 30 dias foi relatado por 12,4 por cento dos universitários. Entre os eventos ocorridos após a ingestão de bebidas alcoólicas, os estudantes citaram envolvimento em briga (4,7 por cento), acidentes (2,4 por cento), faltaà escola (33,7 por cento), falta ao trabalho (11,8 por cento) e conducão de veículos (47,3 por cento). A opinião sobre as drogas e o padrão de uso dos estudantes não diferem muito dos estudos semelhantes em outras regiões do Brasil.